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个人信息Personal Information
教授
博士生导师
硕士生导师
性别：男
毕业院校：大连理工大学
学位：博士
所在单位：海洋科学与技术学院
学科：生物化工. 生物化学与分子生物学. 生物工程与技术
办公地点：大连理工大学生物工程楼323；盘锦校区D06 302室
联系方式：E-mail:biosci@dlut.edu.cn Tel:13332280036
电子邮箱：biosci@dlut.edu.cn
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小肽多拷贝基因表达载体的构建及其高效表达
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论文类型：期刊论文
发表时间：2002-06-10
发表刊物：中国生物化学与分子生物学报
收录刊物：ISTIC、CSCD
卷号：18
期号：3
页面范围：287-292
ISSN号：1007-7626
关键字：小肽多拷贝基因,定向插入,表达载体,EcoT14 Ⅰ,高效表达 multiple copies peptide gene unidirectional insertion high-level expression EcoT14 Ⅰ
摘要：介绍一种快速、高效构建小肽多拷贝基因表达载体的策略,并构建了相应的表达载体pETE-coT.用人工合成的编码28个氨基酸残基的胸腺素α1基因为模型,采用限制酶EcoT14I识别序列CCAAGG为小肽基因两末端序列,利用其酶切后可产生非镜相对称粘性末端,一次连接反应就构建出一系列不同基因拷贝数的表达载体;在小肽基因两端分别引进编码Factor Xa和羟胺蛋白切割位点的序列,表达出的融合蛋白可被Factor Xa和羟胺剪切出不残留任何外源氨基酸的小肽.不同拷贝数的小肽融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中均获得高效表达.