袁文杰

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教授

博士生导师

硕士生导师

主要任职:生物工程学院副院长

其他任职:辽宁省生物工程教指委秘书长

性别:女

毕业院校:大连理工大学

学位:博士

所在单位:生物工程学院

学科:生物化工

办公地点:生物楼321

联系方式:0411-84706802

电子邮箱:ywj@dlut.edu.cn

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论文成果

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褐藻胶裂解酶基因的克隆表达与酶学性质

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论文类型:期刊论文

第一作者:高洁

合写作者:李益民,杜聪,裴绪泽,卢慧敏,赵孝阳,袁文杰

发表时间:2018-07-25

发表刊物:生物工程学报

收录刊物:PubMed

卷号:34

期号:7

页面范围:1178-1188

ISSN号:1000-3061

关键字:褐藻胶裂解酶;解藻酸弧菌;克隆表达;酶性质;燃料乙醇

摘要:随着大型褐藻生产燃料乙醇以及褐藻寡糖重大药用价值的发现,褐藻胶裂解酶成为国内外多个领域的研究重点.文中对解藻酸弧菌上与褐藻胶降解相关的5个基因分别进行克隆表达,通过SDS-PAGE和酶活性定量测定,发现该基因簇中的4个基因有降解褐藻胶活性.对酶活最高的rAlgV3进行了诱导条件的优化、酶蛋白纯化及酶性质研究,发现优化诱导条件后重组酶rAlgV3的酶活由2.34x 104 U/L上升为1.68× 105 U/L,比优化前提高了7.3倍;对酶性质进行表征发现该酶在4-70℃均有活性,最适反应温度为40℃,在4-20℃酶相对稳定;该酶在pH 6.5-9.0环境下均有较高的酶活,最适pH为8.0;pH稳定性好,在pH 4.5-9.5环境下可以稳定存在;适量的NaC1浓度和Fe2+、Fe3+等离子具有促进酶活的作用,SDS和Cu2+离子可明显抑制酶活力.对该酶的底物特性的研究发现,该酶不仅可以降解褐藻胶中的Poly-M片段,也能降解Poly-G片段,具有广泛底物特性;其降解海藻酸钠主要释放二糖和三糖,是一种内切酶.该酶对于第三代燃料乙醇的发展及褐藻寡糖的生产具有重要作用.