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论文类型：期刊论文

发表时间：2018-01-01

发表刊物：食品科学

收录刊物：CSCD

卷号：39

期号：6

页面范围：276-283

ISSN号：1002-6630

关键字：多重PCR;快速检测;食源性病原微生物;鲜切果蔬

摘要：研发可同时检测鲜切果蔬中的单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157∶H7的多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法.根据单核细胞性李斯特菌加inlA基因、鼠伤寒沙门菌invA基因、大肠杆菌O157∶H7 wzy基因、金黄色葡萄球菌nuc基因设计及筛选出4对引物.对多重PCR体系及条件进行优化.该方法对单核细胞性李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157∶H7的检出限分别为3.5×106、1.6×105、2.4×105、4.8×105 CFU/mL.将优化的多重PCR方法对不同接种量富集后验证,结果表明,经过9h富集后,该方法检出限为1CFU/mL.该方法在鲜切莴苣、鲜切黄瓜、鲜切木瓜、鲜切哈密瓜中应用同样可扩增出4条目标菌.因此,利用所建立的多重PCR方法对鲜切果蔬中侵染的病原菌检出限可达到1 CFU/g.该方法相较于传统的培养检测方法具有节约大量的劳力、试剂、时间等优点,检测时间也由原来的5～7 d缩短至9～11h,对于企业或分析检验中心大批量样品的监测具有指导意义.