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论文类型：会议论文

发表时间：2005-04-01

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关键字：旋转壁式生物反应器;成骨细胞;生物衍生骨;组织工程骨

摘要：目的利用生物反应器促进种子细胞在材料中的生长、增殖和分化,在体外得到较大量的组织,是构建组织工程产品的重要手段。本研究利用旋转壁式生物反应器(Rotating Wall Vessel,RWV)构建组织工程骨与静态环境培养中构建的组织工程骨进行比较,为研发适合构建组织工程骨的生物反应器提供理想依据。方法将来源于新西兰大耳白兔颅骨的成骨细胞标记绿色荧光蛋白,以一定密度接种在一定体积的生物衍生骨支架材料上,24h后置RWV中,启动RWV外部的温控、气控以及培养基的循环装置,将内外筒的转速调至10r/min,每12h时取一次样,分别进行乳酸、葡萄糖、pH值和碱性磷酸酶的测定。第3、5和8天时取出标本通过扫描电镜、激光共聚焦显微镜、组织学、免疫组织化学、流式细胞仪、细胞计数、染色体倍体分析等手段比较利用RWV构建的组织工程骨与静态培养构建的组织工程骨差异。结果通过RWV构建的组织工程骨优于静态培养构建的组织工程骨。反应器中细胞的生长速度和葡萄糖的消耗量高于静态,而乳酸的产生量低于静态;成骨细胞长入支架的微孔中比静态更多地分泌胞外基质和钙化结节生成;细胞生成量是静态的5.2倍;其蛋白质表达和染色体倍体证实反应器中的成骨