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论文类型：期刊论文

发表时间：2012-01-15

发表刊物：华南理工大学学报（自然科学版）

收录刊物：EI、PKU、ISTIC、CSCD、Scopus

卷号：40

期号：1

页面范围：120-124

ISSN号：1000-565X

关键字：活性污泥;宏基因组DNA;Fosmid文库;活性筛选;淀粉酶

摘要：大插入片段宏基因组文库的构建是开发大片段目的基因及分析其结构与功能的基础.文中分别采用十六烷基三甲基溴化铵( CTAB)法、试剂盒及琼脂糖包埋法提取活性污泥宏基因组DNA,其中琼脂糖包埋法获得的DNA片段大于23 kbp,利用此DNA成功构建了以pCC1FOS为载体的Fosmid文库,该文库含有5280个克隆,平均插入片段长度为35～40kbp,共包含约200Mbp的宏基因组DNA.从此文库中随机挑选200个克隆,利用活性筛选方法快速筛选到了1个含有淀粉酶的阳性克隆,表明活性污泥Fosmid文库可用于功能基因的活性筛选,具有开发新基因的潜力.