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Indexed by:期刊论文

Date of Publication:2002-01-28

Journal:遗传

Included Journals:PubMed、PKU、ISTIC、CSCD

Volume:24

Issue:1

Page Number:9-14

ISSN No.:0253-9772

Key Words:人乳铁蛋白;脂质体;固定化;细胞表达

Abstract:通过PCR法直接克隆了2.366kb的人乳铁蛋白基因cDNA序列及800bp的山羊β∕乳球蛋白基因5′端调控序列,并连接到表达载体pLNCX中.利用脂质体包裹含人乳铁蛋白基因cDNA的重组质粒pLNCXHLF,并导入到小鼠乳腺癌细胞株MA∕782中,G418及PCR筛选获得阳性单克隆细胞,增殖后,转染细胞利用海藻酸钠固定化包埋培养,经激素诱导,培养液上清通过Western印记检测证明,转染细胞表达并分泌出人乳铁蛋白,分子质量为34kDa;ELISA法测出,每升培养基(含105个细胞)重组蛋白最高表达量为65mg;抗菌实验表明,所获得的重组人乳铁蛋白具有抑制大肠杆菌生长的作用,而且比人乳铁蛋白标准品作用更强.