人乳铁蛋白基因克隆及表达载体构建
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论文类型:期刊论文
发表时间:2000-11-30
发表刊物:大连理工大学学报
收录刊物:CSCD、PKU
卷号:19
期号:6
页面范围:696-701
ISSN号:1000-8608
关键字:基因/乳铁蛋白;β-乳球蛋白;PCR;同源序列连接
摘要:通过PCR法扩增出2 366 bp的人乳铁蛋白cDNA、800 bp的山羊β-乳球蛋白基因5′端调控序列,经PCR反应连接后,克隆到表达载体pLNCX中. 测序结果表明:与Gene Bank中登录的序列相比,所获人乳铁蛋白cDNA序列的同源性为99.74%,山羊β-乳球蛋白基因5′端调控序列的同源性为99.75%. 酶切结果证明得到了正确的重组载体,可用于乳腺生物反应器的研究. 利用PCR反应直接克隆目的片段,并通过同源序列进行PCR连接,极大提高了克隆的速度和准确性,为基因克隆及其表达研究带来了方便.
