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论文类型：期刊论文

发表时间：2003-06-20

发表刊物：中国老年学杂志

收录刊物：PKU、ISTIC、CSCD

卷号：23

期号：6

页面范围：377-379

ISSN号：1005-9202

关键字：基因治疗;蛇毒类凝血酶;血栓;淋巴细胞

摘要：目的探讨大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(Gloshedobin,GSB)基因转染人外周血淋巴细胞而达到溶栓和防栓的效果.方法应用PCR及PCR重组技术,将GSB基因克隆入逆转录病毒载体pLNCX,以脂质体介导转染人外周血淋巴细胞,并借助于IL-2的分泌通路,使GSB分泌至胞外.转染后从mRNA、DNA和蛋白质水平检测GSB的表达情况.结果转染后24 h、48 h、72 h,mRNA和DNA水平均有外源基因GSB的表达;蛋白质SDS-PAGE在30 kD左右出现一条带;转染上清于405 nm波长处测得精氨酸酯酶的OD值为0.332～0.349.结论 GSB基因在人外周血淋巴细胞中表达,并分泌至胞外,且转染上清具有精氨酸酯酶活性.