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论文类型：期刊论文

发表时间：2009-01-15

发表刊物：遗传

收录刊物：Scopus、PubMed、PKU、ISTIC、CSCD

卷号：31

期号：1

页面范围：95-100

ISSN号：0253-9772

关键字：GFP;无载体骨架;无选择标记;子房滴注法;转基因玉米

摘要：转基因植物中的载体骨架序列和选择标记基因是引起生物安全性争论的根本原因,最直接、最有效的解决方法是在转化过程中不使用载体骨架序列和选择标记基因.本研究建立并优化了玉米子房滴注转化法.其操作要点是将DNA转化溶液直接滴加在完全去除花柱的子房上.利用子房滴注法将无载体骨架序列和选择标记的线性GFP基因表达框转化玉米.PCR结果表明:适合子房滴注法转化的玉米品种为9818,最佳转化时间为授粉后18～20h,在此条件下得到最高的PCR阳性率,为3.01%;Southern blotting结果表明外源基因的整合方式简单(1～2条杂交带);RT-PCR结果表明转基因植株中GFP基因能够在RNA水平上正常表达;在转基因植株的根和幼胚中观察到GFP表达.