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Indexed by:期刊论文

Date of Publication:2002-01-01

Journal:中国林学(英文版)

Volume:4

Issue:1

Page Number:13-17

ISSN No.:1008-1321

Key Words:基因克隆;cDNA末端快速扩增PCR;紫穗槐;4-香豆酸:CoA连接酶;木质素

Abstract:4-香豆酸:CoA连接酶(4CL)是木质素生物合成过程中重要的酶.该文利用简并寡核苷酸PCR法结合eDNA末端快速扩增PCR法直接获得了紫穗槐4CLA cDNA全长序列,避免了复杂的构建、筛选cDNA文库的过程.先用简并pCR得到了4CLAl片段,又据此片段设计反向嵌套引物,用RACE方法获得未知的5'和3'端序列.所获得的全长4CLA cDNA,编码540个氨基酸.氨基酸序列同源性分析表明4CLA是典型的4CL蛋白,含有预计的AMP-binding位点、催化反应区和保守的Cys.