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发布时间：2019-03-11

论文类型：期刊论文

发表时间：2007-04-30

发表刊物：生物技术

收录刊物：CSCD

卷号：17

期号：2

页面范围：19-22

ISSN号：1004-311X

关键字：黑曲霉;植酸酶基因;表达;毕赤酵母;性质

摘要：目的:表达黑曲霉WY-6植酸酶基因及研究重组酶的性质.方法:通过PCR方法从黑曲霉WY-6基因组中扩增出植酸酶基因,并将该基因表达在毕赤酵母中,再利用蛋白质分离纯化技术对重组酶进行纯化,并测定其性质.结果:黑曲霉WY-6植酸酶基因成功表达在毕赤酵母中,重组植酸酶经饱和硫酸铵分级沉淀、超滤和阴离子交换层析步骤后得以纯化,纯化后的植酸酶比活力为147U/mg,分子量为67kDa,两个最适pH分别为3.0和5.5,最适温度为55℃,与胃蛋白酶以0.01的比率(胃蛋白酶/植酸酶,wt/wt)混合作用2h后仍保留70.9%残余活力.结论:获得了具有商业应用潜能的基因工程植酸酶.