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个人信息Personal Information
教授
博士生导师
硕士生导师
性别：男
毕业院校：大连理工大学
学位：博士
所在单位：生物工程学院
学科：生物化工. 生物化学与分子生物学. 生物工程与技术
办公地点：大连理工大学生物工程楼323；盘锦校区D06 302室
联系方式：E-mail:biosci@dlut.edu.cn Tel:13332280036
电子邮箱：biosci@dlut.edu.cn
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大容量人源单链抗体库构建中轻链重链可变区的连接
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论文类型：期刊论文
发表时间：2001-11-25
发表刊物：免疫学杂志
收录刊物：PKU、CSCD
卷号：17
期号：6
页面范围：472-474
ISSN号：1000-8861
关键字：单链抗体;抗体库;不对称PCR;多样性
摘要：目的单链抗体库的构建过程中,多采用轻链可变区(VL)、重链可变区(VH)、和linker 3条片段重叠延伸拼接法(SOE)进行连接.为了优化抗体库的多样性,提高效率,探讨了新的连接方法.方法通过不对称PCR制备单链DNA,再俩俩连接,得到单链抗体(ScFv)基因.分别将SOE法及不对称PCR法连接得到的ScFv基因与载体连接,转化E.coli TG1,构建抗体库.结果后者只需25次连接反应,78次电击转化,既可达到1×1010库容量.结论可以认为新方法具有更高的基因构建效率,并有效提高了抗体库的多样性.