包永明
个人信息Personal Information
教授
博士生导师
硕士生导师
性别:男
毕业院校:大连理工大学
学位:博士
所在单位:生物工程学院
学科:生物化工. 生物化学与分子生物学. 生物工程与技术
办公地点:大连理工大学生物工程楼323;盘锦校区D06 302室
联系方式:E-mail:biosci@dlut.edu.cn Tel:13332280036
电子邮箱:biosci@dlut.edu.cn
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蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化
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论文类型:期刊论文
发表时间:2003-03-30
发表刊物:无锡轻工大学学报
收录刊物:CSCD
卷号:22
期号:2
页面范围:22-25
ISSN号:1673-1689
关键字:类凝血酶 固定化金属亲和层析 融合表达 大肠杆菌
摘要:将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(G1oshedobin)基因克隆到载体pET32-a(+)上,在T7lac启动子下以N端融合硫氧还蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,诱导条件为:30℃诱导6 h,IPTG浓度为1 mmol/L.利用固定化金属离子(Ni2+)亲和层析分别对胞内可溶物和变性条件下的包涵体进行纯化.通过SDS-PAGE检测融合蛋白的纯度,采用点杂交和纤维蛋白凝结活性检测分析,显示纯化产物具有较高生物活性.