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论文类型：期刊论文

发表时间：2019-05-08

发表刊物：色谱

收录刊物：PKU

卷号：37

期号：5

页面范围：533-538

ISSN号：1000-8713

关键字：凝胶过滤色谱;β2微球蛋白;蛋白质定量检测

摘要：β2微球蛋白(B2M)标准品是研究透析相关淀粉样变和评估血液透析器透过效率的重要试剂.B2M易于聚集的特性导致其作为标准品的单体浓度降低,使得检测结果准确性下降.为了准确评价B2M标准品的质量,该研究建立了基于凝胶过滤色谱的B2M样品中非聚集单体的定量检测方法.使用TSKgel SuperSW2000(30 cm×4.6 mm,4μm)凝胶筛分色谱柱,流动相为0.01 mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.2～7.4),流速为0.5 mL/min,柱温为25℃.使用紫外检测器,检测波长为280 nm,外标法定量.在0.05～0.50 g/L的B2M单体质量浓度范围内线性良好,相关系数为0.9948.定量限(信噪比为10)为0.08 g/L,添加水平为0.10～0.30 g/L时,回收率为85.0％～96.7％,相对标准偏差为1.7％～3.3％.使用该方法对实验室自制重组人B2M标准品进行了质量检测,结果显示,该方法处理简单,准确度高,稳定性好,且不受溶液中B2M二聚体的干扰,适用于B2M标准品的质量分析.