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Indexed by:期刊论文

Date of Publication:2013-06-17

Journal:生物工程学报

Included Journals:PKU、ISTIC、CSCD、Scopus

Volume:29

Issue:11

Page Number:1617-1628

ISSN No.:1000-3061

Key Words:脐带间充质干细胞;脂肪间充质干细胞;心肌分化;1-磷酸鞘氨醇;心肌细胞

Abstract:为研究1-磷酸鞘氨醇(Sphingosine-1-phosphate,S1P)对脐带间充质干细胞(Umbilical cord mesenchymal stem cells,UC-MSCs)和脂肪间充质干细胞(Adipose derived mesenchymal stem cells,AD-MSCs)向心肌分化的影响,探索其适宜的作用时间和浓度,将UC-MSCs和AD-MSCs接种到培养板,用添加不同浓度S1P的心肌细胞培养液诱导两种干细胞向心肌分化,诱导时间分为7d、14d和28 d.采用免疫荧光染色检测心肌特异性蛋白,α-肌动蛋白(α-actin)、缝隙连接蛋白(Connexin-43)以及肌球蛋白重链(MYH-6)的表达,并通过共聚焦显微镜和荧光显微镜进行观察;采用MTT分析细胞的活性;膜片钳检测分化细胞的钙瞬变(此为心肌细胞的功能性指标).结果表明,S1P与心肌细胞培养液协同作用,能够促进UC-MSCs和AD-MSCs向心肌细胞的分化.并且,随着S1P浓度的增加,促分化作用增强,但细胞活性降低.S1P在心肌细胞培养液中的适宜作用时间为14d,适宜作用浓度为0.5μmol/L.而且联合心肌细胞培养液可以使UC-MSCs和AD-MSCs的心肌分化细胞产生钙瞬变,具有类似心肌细胞的功能性.S1P能够与心肌细胞培养液协同作用,促进UC-MSCs和AD-MSCs的心肌功能性分化.