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论文类型：期刊论文

发表时间：2008-06-15

发表刊物：高校化学工程学报

收录刊物：EI、PKU、ISTIC、CSCD

卷号：22

期号：3

页面范围：471-477

ISSN号：1003-9015

关键字：干细胞扩增 造血干/祖细胞 CD34+细胞扩增 间充质干细胞 ACA微胶囊 RWV生物反应器

摘要：为了构建一种新型的造血干细胞和基质细胞动态共培养体系,脐带血单个核细胞和包埋有兔骨髓间充质干细胞的海藻酸钠-壳聚糖-海藻酸钠(alginate-chitosan-alginate, ACA)微胶囊在旋转壁式生物反应器(rotating wall vessel, RWV)中进行了7d动态悬浮共培养.培养液不含血清,补充多种生长因子(SCF 50ng·mL-1,FL 50ng·mL-1,TPO 50ng·mL-1及IL-325ng·mL-1).每24h进行总有核细胞计数,并测量培养液的pH和渗透压,在0h、72h和168h进行流式CD34+细胞分析以及集落形成能力检验.结果表明在RWV动态共培养过程中,培养液的pH保持在7.2~7.4,渗透压保持在280~310mmOsmol·kg-1,均适合造血干/祖细胞的体外扩增.经过7d的无血清动态共培养,总有核细胞、CD34+细胞以及混合集落(colony-forming units in culture, CFU-Cs)分别扩增了107.05±6.08,26.52±1.5和19.2±3.18倍.这种新型的动态微囊化共培养体系支持了造血干/祖细胞的大规模体外扩增,基质细胞抑制了造血干/祖细胞的分化,微胶囊对造血细胞和基质细胞进行了免疫隔离,RWV则为细胞和微胶囊提供了优良的低剪切力的悬浮培养环境.