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Indexed by:期刊论文

Date of Publication:2014-01-01

Journal:蚕业科学

Included Journals:PKU、ISTIC、CSCD

Volume:40

Issue:4

Page Number:639-647

Key Words:柞蚕脂肪酶; 基因克隆; 病毒诱导; 实时荧光定量PCR; 原核表达; 真核表达

Abstract:根据柞蚕cDNA 文库数据设计特异引物,以柞蚕蛹脂肪体cDNA 为模板克隆了3个脂肪酶基因,命名为lipase1462(GenBank 登录号:
   KJ638233) 、lipase1501(GenBank 登录号: KJ638234)和lipase1725(GenBank 登录号:
   KJ638235)
   。3个基因编码的蛋白质具有昆虫脂肪酶家族的保守结构域及活性位点,与家蚕脂肪酶Bmlipase-1有较近的亲缘关系。为探究柞蚕脂肪酶基因的表达调控
   是否与柞蚕抵抗柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)的侵染有关联,利用实时荧光定量PCR 技术检测柞蚕幼虫在感染ApNPV
   后脂肪体和中肠组织中3个脂肪酶基因的表达水平。结果表明,柞蚕幼虫被ApNPV感染后48 ~ 60
   h,脂肪体和中肠组织中3个脂肪酶基因的表达水平均明显上调,初步推测柞蚕脂肪酶可能与柞蚕对ApNPV侵染的免疫应答有关。分别构建柞蚕脂肪酶基因的原
   核和真核表达载体,SDS-PAGE检测显示柞蚕脂肪酶基因在原核和真核表达系统中均成功表达,为进一步研究柞蚕脂肪酶的生物学功能奠定了基础。