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论文类型：期刊论文

发表时间：2010-07-25

发表刊物：生物工程学报

收录刊物：Scopus、PubMed、PKU、ISTIC、CSCD

卷号：26

期号：7

页面范围：1014-1018

ISSN号：1000-3061

关键字：自絮凝酵母;海藻糖-6-磷酸合成酶TPS1;绿色荧光蛋白;报告载体;乙醇胁迫

摘要：提高生物能源生产菌株对各种胁迫因素的耐受性对于提高生产过程的经济性和高效生产生物能源具有重要的意义.对酿酒酵母乙醇耐性的分子机制的研究,可揭示影响其耐受性的关键基因,并通过代谢工程操作定向提高酵母菌的乙醇耐受性,从而提高燃料乙醇的生产效率.海藻糖对酵母菌在多种环境胁迫下的细胞活性具有保护作用,但其对乙醇耐性分子机制的研究还不够深入.克隆了自絮凝酵母Saccharomyces cerevisiae flo的海藻糖-6-磷酸合成酶基因TPS1的启动子区域,利用pYES2.0载体骨架,构建了PTPS1启动绿色荧光蛋白EGFP标记基因的报告载体,并转化酿酒酵母ATCC4126.对酵母转化子在舍有7%和10%乙醇的生长培养基中的EGFP的表达情况进行相对荧光定量分析,发现PTPS1活性在7%乙醇存在下受到强烈诱导.EGFP表达量对高温和高糖胁迫无明显差别,显示了TPS1启动子对乙醇浓度的特异响应.研究结果表明,絮凝酵母海藻糖的合成是对乙醇胁迫的保护性反应.