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论文类型：期刊论文

发表时间：2016-02-15

发表刊物：高校化学工程学报

收录刊物：EI、PKU、ISTIC、CSCD

卷号：30

期号：1

页面范围：112-120

ISSN号：1003-9015

关键字：聚N-异丙基丙烯酰胺;聚偏氟乙烯;温敏表面;细胞培养;降温脱附

摘要：传统的酶解法用于细胞收获容易导致细胞膜蛋白损伤,致使细胞功能缺失,而具有温敏特性的材料表面用于细胞培养时,可采用降温脱附法收获细胞,从而有效维护细胞的功能.研究将Hela细胞分别接种于常规空白培养板、PVDF膜以及四种不同PVDF-g-PNIPAAm温敏膜上,考察Hela细胞的黏附生长与降温脱附行为.培养过程中,观察细胞生长形态,检测细胞生长活率;收获时,观察细胞在从不同基底表面降温脱附行为,并对降温脱附法和胰酶消化法收获的细胞分别进行死活染色,计算细胞活率.结果表明,Hela细胞在不同基底表面均能正常黏附、铺展与生长;在四种不同PVDF-g-PNIPAAm温敏膜(M21,M32,M11,M23)上,M32与M11较更适宜细胞黏附与生长;当温度降低时Hela细胞不能从常规空白培养板及PVDF膜上自动脱附,但均能从四种温敏膜上自动脱附,脱附速率为M1 1＞M32＞M21＞M23;降温脱附法比胰酶消化法收获的细胞活率更高,分别为(95±3.47)％与(81±2.26)％.PVDF-g-PNIPAAm温敏膜用于Hela细胞培养与收获的研究,为下一步采用温敏性PVDF-g-PNIPAAm中空纤维膜生物反应器大规模扩增并无损伤收获细胞奠定了基础.