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造血干/祖细胞的体外扩增培养研究

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Indexed by:期刊论文

Date of Publication:2007-08-15

Journal:生物医学工程学杂志

Included Journals:Scopus、PubMed、PKU、ISTIC、CSCD

Volume:24

Issue:4

Page Number:870-875

ISSN No.:1001-5515

Key Words:造血干/祖细胞;旋转壁式生物反应器;脐带血;体外扩增

Abstract:利用旋转壁式生物反应器(Rotating wall vessel,RWV)体外培养脐带血干细胞,使其大量扩增,以满足临床应用对造血干/祖细胞的数量与质量要求.从脐带血分离得到的单个核细胞(Mononuclear cells,MNC)在T-flask中培养24 h,之后接种到RWV反应器中,培养200 h.每24 h细胞计数,测量培养基的pH和渗透压变化;在144 h和197 h测CD34+细胞含量并做CFU-GM半固体培养.有核细胞(Nucleated cells, NC)与CD34+细胞在第197 h,分别扩增了435.5±87.6倍和32.7±15.6倍,CFU-GM(Colony-forming unit-granulocyte/macrophage)细胞扩增了21.7±4.9倍.整个培养过程中,RWV反应器中的pH和渗透压都保持在造血细胞最佳的扩增条件内,pH基本保持在7.2~7.4之间,渗透压基本保持在290~310 mmol/kg之间.由于旋转壁式生物反应器(RWV)结构上的特殊性,可以保证细胞在悬浮流动的状态下生长,很好地模拟了脐带中的造血微环境,使脐带血造血干细胞在该反应器中短期内得到大量扩增.

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