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论文类型：期刊论文

发表时间：2017-01-01

发表刊物：药学学报

收录刊物：Scopus、CSCD

卷号：52

期号：1

页面范围：58-65

ISSN号：0513-4870

关键字：羧酸酯酶1; BODIPY母核; 荧光探针; 特异性; 抑制剂筛选

摘要：羧酸酯酶1 (carboxylesterase 1,
   CE1)是哺乳动物体内分布的一种重要的丝氨酸水解酶,广泛参与多种内外源性酯类化合物(包括胆固醇酯等内源物,以及酯类药物及杀虫剂等外源物)的水解代
   谢。本研究基于人羧酸酯酶1
   (hCE1)偏好底物的结构特征,选取8-羧酸-BODIPY为荧光母核,设计合成了4种BODIPY-8-羧酸酯衍生物,进而通过单酶筛选和酶抑制实验
   考察了hCE1催化4种酯类底物的特异性。研究发现, BODIPY-8-羧酸酯的醇基部分越小, hCE1对底物的选择性越高,
   BODIPY-8-羧酸甲酯(BCM)和BODIPY-8-羧酸乙酯(BCE)均可以作为hCE1的特异性荧光探针底物。在此基础上,选择了水解速率更快
   的BCM为hCE1探针底物,进一步考察了BCM在人肝微粒体(HLM)和hCE1单酶中的水解动力学,并借助该底物开展了hCE1抑制剂的高效表征研究
   。研究发现BCM在HLM和hCE1中的酶动力学行为及Km值非常接近,表明hCE1是HLM中参与BCM水解的主要代谢酶。此外,抑制剂表征实验表明B
   CM可用于hCE1抑制剂的高效筛选与评价,且可用HLM代替hCE1单酶进行酶抑制剂的筛选与评价。