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Indexed by:期刊论文

Date of Publication:2017-11-20

Journal:微生物学通报

Included Journals:CSCD

Volume:44

Issue:11

Page Number:2634-2643

ISSN No.:0253-2654

Key Words:靛蓝合成基因;吲哚;色氨酸;微生物合成

Abstract:[目的]克隆和表达靛蓝合成基因,并将其用于靛蓝合成研究.[方法]对菌株Burkholderia sp.IDO3中靛蓝合成基因进行克隆和大肠杆菌异源表达,构建能合成蓝色色素的基因工程菌.利用液相色谱和质谱对产物进行分析,采用单因素法对培养温度、转速、培养基成分等进行优化,并考察优化条件下的靛蓝合成曲线.[结果]构建了一株重组大肠杆菌E.coli IND_AB,该菌株能够在LB培养基生长的过程中合成蓝色色素,产物分析表明该色素为靛蓝;菌株IND AB在30℃和150 r/min条件下能在LB培养基中合成22.9 mg/L靛蓝,优化培养条件后产量达到25.4 mg/L;优化LB培养基各组分浓度后产量可提高到35.1 mg/L;外加50.0 mg/L吲哚或0.1 g/L色氨酸后靛蓝产量可分别提高到57.7 mg/L和64.4 mg/L,相比初始产量提高了152.0％和181.2％;靛蓝合成曲线表明在添加吲哚或色氨酸的培养基中,菌株INDAB前6h没有靛蓝生成,6-15h为靛蓝合成加速期,18h达到产量平衡.[结论]重组大肠杆菌1NDAB可用于生物合成高纯度靛蓝,为靛蓝的微生物合成提供了有效的基因资源.