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Indexed by:期刊论文

Date of Publication:2001-10-01

Journal:光谱学与光谱分析

Included Journals:SCIE、PubMed、PKU、CSCD、Scopus

Volume:21

Issue:5

Page Number:701-703

ISSN No.:1000-0593

Key Words:分光光度法;碱性磷酸酶;抑制作用;动力学

Abstract:运用邹氏酶活性不可逆改变动力学,在不同酶底物浓度及不同抑制剂浓度下,用分光光度法监测酶底物水解产物浓度随时间变化的过程,研究了抑制剂EDTA对小牛肠碱性磷酸酶活性的不可逆抑制作用.结果表明:EDTA对小牛肠碱性磷酸酶抑制反应机理为:EDTA与小牛肠碱性磷酸酶发生络合作用,形成中间态的酶-EDTA络合物,此络合物的形成,导致该酶活性中心微环境构象发生变化,使酶的催化活性丧失,随后EDTA将酶中金属离子拉出,使酶发生不可逆失活.实验测定了37℃下EDTA对小牛肠碱性磷酸酶不可逆抑制作用的微观速率常数ki为0.052 9 s-1及EDTA与酶结合的平衡常数KI为4.00 mmol@L-1.