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论文类型：期刊论文

发表时间：2002-06-30

发表刊物：Forestry Studies in China

期号：01

页面范围：13-17

ISSN号：1008-1321

关键字：基因克隆;cDNA末端快速扩增PCR;紫穗槐;4-香豆酸:CoA连接酶;木质素

摘要：4 香豆酸 :CoA连接酶 (4CL)是木质素生物合成过程中重要的酶 .该文利用简并寡核苷酸PCR法结合cDNA末端快速扩增PCR法直接获得了紫穗槐 4CLAcDNA全长序列 ,避免了复杂的构建、筛选cDNA文库的过程 .先用简并PCR得到了 4CLA1片段 ,又据此片段设计反向嵌套引物 ,用RACE方法获得未知的 5′和 3′端序列 .所获得的全长 4CLAcDNA ,编码 5 40个氨基酸 .氨基酸序列同源性分析表明4CLA是典型的 4CL蛋白 ,含有预计的AMP binding位点、催化反应区和保守的Cys .