点击次数：

论文类型：期刊论文

发表时间：2017-01-01

发表刊物：植物保护学报

收录刊物：CSCD

卷号：44

期号：4

页面范围：630-635

ISSN号：0577-7518

关键字：百合斑驳病毒;外壳蛋白基因;原核表达;抗血清制备

摘要：为了建立百合斑驳病毒(Lily mottle virus,LMoV)的快速检测方法,采用RT-PCR方法从感染LMoV的百合叶片中克隆该病毒的外壳蛋白(coat protein,Cp)基因,然后连接到原核表达载体pET28a(+)上,导入大肠杆菌Escherichia eoli BL21 (DE3)并诱导表达,以表达的重组蛋白为抗原制备该病毒的抗血清.结果显示:LMoV CP全长为822 bp,编码274个氨基酸;SDS-PAGE及Westernblot检测结果表明,经IPTG诱导得到了分子量约为34 kD带有HIS标签的目的蛋白;用该蛋白制备的抗血清经间接ELISA和Western blot检测结果显示,其效价为1:51 200,具有较高的特异性,可用于感染LMoV百合的检测,其检测结果与RT-PCR检测结果一致.