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论文类型： 期刊论文

发表时间： 2016-06-15

发表刊物： 中国生物工程杂志

收录刊物： ISTIC、CSCD、PKU

卷号： 36

期号： 6

页面范围： 81-86

ISSN号： 1671-8135

关键字： 海洋红酵母;农杆菌介导转化;潮霉素

摘要： 海洋红酵母作为一种产油微生物富含油脂和类胡萝卜素,但由于没有合适的遗传操作方法,无法对细胞反应器进行理性改进,阻碍了它的进一步发展.首先利用农杆菌介导转化成功构建了海洋红酵母的遗传操作平台.参考完成基因注释的圆红冬孢酵母基因组信息,分离其甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子,以基于圆红冬孢酵母密码子优化的潮霉素作为筛选标记,构建载体转化a农杆菌AGL1中,利用农杆菌介导转化成功得到潮霉素抗性表型正确的转化子,通过表型验证,基因型验证以及Western blot在蛋白水平验证,鉴定了hyg基因的有效表达,证明了外源抗性基因成功导入海洋红酵母菌株中,实现了海洋红酵母新的转化方法的建立.