点击次数：

论文类型：期刊论文

发表时间：2001-11-25

发表刊物：免疫学杂志

收录刊物：PKU、CSCD

卷号：17

期号：6

页面范围：472-474

ISSN号：1000-8861

关键字：单链抗体;抗体库;不对称PCR;多样性

摘要：目的单链抗体库的构建过程中,多采用轻链可变区(VL)、重链可变区(VH)、和linker 3条片段重叠延伸拼接法(SOE)进行连接.为了优化抗体库的多样性,提高效率,探讨了新的连接方法.方法通过不对称PCR制备单链DNA,再俩俩连接,得到单链抗体(ScFv)基因.分别将SOE法及不对称PCR法连接得到的ScFv基因与载体连接,转化E.coli TG1,构建抗体库.结果后者只需25次连接反应,78次电击转化,既可达到1×1010库容量.结论可以认为新方法具有更高的基因构建效率,并有效提高了抗体库的多样性.