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pNA法测定大鼠血浆中重组水蛭素

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Indexed by:会议论文

Date of Publication:2009-10-23

Page Number:1

Key Words:重组水蛭素;pNA法;凝血酶;大鼠;药代动力学

Abstract:目的:建立重组水蛭素(r-hirudin,rH)血药浓度的测定方法。方法:采用TGPApNA(Tosyl-glycyl-polylarginine-4-nitrniline-acetate)与测定体系中未被水蛭素抑制的凝血酶(Thrombin,Th)发生水解反应,释放出生色物质4-硝基苯胺(pNA),其在405 nm处有光吸收(OD),间接测定rH的含量;采用血浆中加0.1 ml 1 mol/ml的HCl、65℃5分钟,再用NaOH中和,以破血浆中凝血酶Ⅲ和纤维蛋白原的干扰。结果:rH在3.125~40 ng/ml范围内,与OD值呈线性负相关(r>0.99);应用上述方法测定大鼠iv 2.0 mg/kg的rH后不同时间的血浆药物浓度,结果表明该药符合二室模型一级动力学过程。结论:用pNA法测定大鼠血浆中重组水蛭素准确、可靠、重现性好,可用于血浆中rH的含量测定。

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