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大容量天然人源单链抗体库的构建及抗乙型肝炎病毒PreS1单链抗体的淘选

Release Time:2019-03-11  Hits:

Indexed by: Journal Article

Date of Publication: 2004-09-30

Journal: 吉林大学学报(医学版)

Included Journals: CSCD、ISTIC

Volume: 30

Issue: 5

Page Number: 753-755

ISSN: 1671-587X

Key Words: 单链抗体;肝炎病毒,乙型;肝炎表面抗原,乙型;细菌噬菌体;抗体库

Abstract: 目的:从大容量抗体库中淘选全人源化抗乙型肝炎病毒PreS1的单链抗体.方法:以60例健康供者的外周血淋巴细胞为来源,构建了1010人源天然单链抗体库,并以PreS1抗原肽进行淘选.3轮淘选后,单克隆经ELISA检测,富集的特异性单克隆经E.coli HB2151表达后进行Western检测并测序.结果:3轮淘选之后,噬菌体的投入/产出比提高了100倍.抗原抗体反应结果显示,A410=1.0的抗PreS1的单链抗体得到富集.Western结果显示其插入的单链抗体片段正确.该抗体基因序列的DNAPLOT软件分析结果进一步表明该抗体是人抗体,其VH属于VH1亚族,Vλ属于Vλ1亚族.结论:这一技术是获得全人源化抗PreS1的单链抗体的有效途径,同时为基因工程抗体用于临床治疗乙型肝炎奠定基础.

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