论文名称：蛇毒类凝血酶基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化
论文类型：期刊论文
发表刊物：无锡轻工大学学报
收录刊物：CSCD
卷号：22
期号：2
页面范围：22-25
ISSN号：1673-1689
关键字：类凝血酶 固定化金属亲和层析 融合表达 大肠杆菌
摘要：将大连蛇岛蝮蛇毒类凝血酶(G1oshedobin)基因克隆到载体pET32-a(+)上,在T7lac启动子下以N端融合硫氧还蛋白的形式在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,诱导条件为:30℃诱导6 h,IPTG浓度为1 mmol/L.利用固定化金属离子(Ni2+)亲和层析分别对胞内可溶物和变性条件下的包涵体进行纯化.通过SDS-PAGE检测融合蛋白的纯度,采用点杂交和纤维蛋白凝结活性检测分析,显示纯化产物具有较高生物活性.
发表时间：2003-03-30